"Noc w muzeum" to komedia fantastyczna z rewelacyjnymi efektami specjalnymi. Pechowy marzyciel Larry Daley, którego niestworzone idee nigdy nie zaprocentowały, na gwałt potrzebuje pracy. Zrezygnowany przyjmuje mało ambitną posadę ochroniarza w Muzeum Historii Naturalnej. Pracując na nocną zmianę Larry przypadkowo uwalnia starożytną klątwę, która sprawia, że nocą ożywają zgromadzone w muzeum eksponaty, a wśród nich: szkielety dinozaurów, wypchane zwierzęta prehistoryczne, miniatury ukazujące wielkie bitwy historii i figury przedstawiające słynne postacie historyczne, które wprowadzają w muzeum spore zamieszanie. Teraz Larry musi zrobić wszystko, aby odzyskać kontrolę nad muzeum. W obliczu groźby utraty pracy i kolejnego zawodu uczynionego swemu synowi Nickowi, Larry będzie musiał stoczyć niewyobrażalną bitwę o ratowanie muzeum, mając nadzieję, że wreszcie okaże się tak wspaniałym ojcem, jakim zawsze chciał być.